לאנטיגנים של חלבון רקומביננטי יש לרוב כמה אפיטופים שונים, חלקם אפיטופים של רצף וחלקם אפיטופים מבניים.נוגדנים רב שבטיים המתקבלים על ידי חיסון בעלי חיים עם אנטיגנים דנטורציה הם תערובות של נוגדנים ספציפיים לאפיטופים בודדים וניתן להשתמש בהם באופן כללי כדי לזהות מבנים טבעיים או חלבוני מטרה מפוגנים.יתרון לוואי של שימוש בחלבונים דנטורטיים כאימונוגנים הוא שחלבונים דנטורטיביים נוטים להיות אימונוגניים יותר ויכולים לעורר תגובה חיסונית חזקה בבעלי חיים.
מערכת הביטוי של Escherichia coli נבחרת בדרך כלל למטרות אנטיגניות מכיוון שהיא המערכת היקרה ביותר במונחים של זמן וכסף.על מנת לשפר את האפשרות של ביטוי חלבון המטרה ואת נוחות הטיהור, לפעמים בא לידי ביטוי רק קטע קטן מחלבון המטרה, כמו תחום ספציפי.
המבנה התלת מימדי של חלבונים
התחום הספציפי של חלבון
אם מטרת הכנת הנוגדנים היא אך ורק לגילוי wb, חסכוני ומהיר להשתמש בפפטיד קטן סינתטי כאנטיגן, אך קיים סיכון לאימוגניות חלשה או אי-התחדשות עקב בחירה לא מתאימה של מקטע פפטיד.מכיוון שהכנת נוגדנים דורשת תקופה ארוכה, לרוב נבחרים שניים או שלושה מקטעי פפטיד שונים להכנת נוגדנים באמצעות אנטיגן פוליפפטיד כדי להבטיח את שיעור ההצלחה של הניסוי.
הטוהר של אנטיגן פוליפפטיד לחיסון נדרש להיות גדול מ-80%.למרות שטוהר גבוה יותר יכול תיאורטית להשיג נוגדנים עם ספציפיות טובה יותר, בפועל, בעלי חיים תמיד מייצרים מספר רב של נוגדנים לא ספציפיים, ובכך מסווה את היתרונות של טוהר האנטיגן.
בנוסף, הכנת נוגדנים מפפטידים קטנים חייבת להיות מקושרת לאנטיגן הנשא המתאים כדי לשפר את האימונוגניות שלו.שני נשאים אנטיגנים נפוצים הם KLH ו-BSA.
זמן פרסום: 23-3-2023