המועדים ביותר לכשלים ופתרונות HPLC

כמכשיר בעל דיוק גבוה, HPLC יכול בקלות להוביל לכמה בעיות קטנות ומטרידות אם הוא לא מופעל בצורה הנכונה במהלך השימוש.אחת הבעיות הנפוצות ביותר היא בעיית דחיסת העמודות.כיצד לפתור במהירות תקלות בכרומטוגרף פגום.מערכת HPLC מורכבת בעיקר מבקבוק מאגר, משאבה, מזרק, עמוד, תא טמפרטורת עמודה, גלאי ומערכת לעיבוד נתונים.עבור המערכת כולה, העמודים, המשאבות והגלאים הם המרכיבים המרכזיים והמיקומים העיקריים המועדים לבעיות.

המפתח ללחץ העמודה הוא האזור שדורש תשומת לב רבה בעת שימוש ב-HPLC.היציבות של לחץ העמודה קשורה קשר הדוק לצורת שיא כרומטוגרפית, יעילות העמודה, יעילות ההפרדה וזמן השמירה.יציבות הלחץ בעמודה אינה אומרת שערך הלחץ יציב בערך יציב, אלא שטווח תנודת הלחץ הוא בין 345kPa או 50PSI (המאפשר שימוש בפליטת שיפוע כאשר לחץ העמוד יציב ומשתנה באיטיות).לחץ גבוה מדי או נמוך מדי הוא בעיית לחץ עמודה.

המועדים ביותר לכשלים ופתרונות HPLC

1, לחץ גבוה הוא הבעיה הנפוצה ביותר בשימוש ב-HPLC.המשמעות היא עלייה פתאומית בלחץ.באופן כללי, ישנן הסיבות הבאות: (1) באופן כללי, זה נובע מחסימת ערוץ זרימה.בשלב זה, עלינו לבחון את זה חלקית.א.ראשית, חתוך את כניסת משאבת הוואקום.בשלב זה, צינור ה-PEEK היה מלא בנוזל כך שצינור ה-PEEK היה קטן יותר מבקבוק הממס כדי לראות אם הנוזל מטפטף כרצונו.אם הנוזל אינו מטפטף או מטפטף לאט, ראש מסנן הממס חסום.טיפול: להשרות בחומצה חנקתית 30% למשך חצי שעה ולשטוף במים טהורים במיוחד.אם הנוזל מטפטף באופן אקראי, ראש מסנן הממס תקין ונבדק;ב.פתחו את שסתום הטיהור כך שהפאזה הניידת לא תעבור דרך העמוד, ואם הלחץ אינו מופחת באופן משמעותי, ראש המסנן הלבן נחסם.טיפול: ראשים לבנים מסוננים הוסרו ועברו צלילים עם 10% איזופרפנול למשך חצי שעה.בהנחה שהלחץ יורד מתחת ל-100PSI, הראש הלבן המסונן תקין ונבדק;ג.הסר את קצה היציאה של העמוד, אם הלחץ לא יורד, העמוד נחסם.טיפול: אם מדובר בחסימת מלח חיץ יש לשטוף 95% עד ללחץ תקין.אם החסימה נגרמת על ידי חומר שמור יותר, יש להשתמש בזרימה חזקה יותר מהשלב הנייד הנוכחי כדי למהר לעבר לחץ רגיל.אם לחץ הניקוי לטווח ארוך לא יורד לפי השיטה הנ"ל, ניתן לראות בכניסה וביציאה של העמוד מחוברים למכשיר להיפך, וניתן לנקות את העמוד עם הפאזה הניידת.בשלב זה, אם לחץ העמוד עדיין לא מופחת, ניתן להחליף את צלחת המסננת בכניסה לעמוד רק, אך ברגע שהפעולה לא טובה, קל להוביל להפחתת אפקט העמוד, אז נסו להשתמש בפחות.לבעיות קשות, ניתן לשקול החלפת עמודות.

(2) הגדרת קצב זרימה שגויה: ניתן לאפס קצב זרימה נכון.

(3) יחס זרימה שגוי: מדד הצמיגות של פרופורציות שונות של זרימות שונה, וגם לחץ המערכת המתאים של הזרימה עם צמיגות גבוהה יותר גדול יותר.במידת האפשר, ממיסים בעלי צמיגות נמוכה יותר ניתן להחליף או להגדיר מחדש ולהכין.

(4) אפס סחיפה של לחץ המערכת: כוונן את האפס של חיישן מפלס הנוזל.

2, הלחץ נמוך מדי (1) נגרם בדרך כלל על ידי דליפת מערכת.מה לעשות: מצא כל חיבור, במיוחד את הממשק בשני קצוות העמוד, והדק את אזור הדליפה.הסר את העמוד והדק את סרט ה-PTFE בכוח מתאים.

(2) הגז נכנס למשאבה, אך הלחץ בדרך כלל אינו יציב בזמן זה, גבוה ונמוך.יותר ברצינות, המשאבה לא תוכל לספוג את הנוזל.שיטת טיפול: פתח את שסתום הניקוי ונקה בקצב זרימה של 3 ~ 5 מ"ל/דקה.אם לא, נשאבו בועות אוויר בשסתום הפליטה באמצעות צינור מחט ייעודי.

(3) אין יציאת פאזה ניידת: יש לבדוק האם יש שלב נייד בבקבוק המאגר, האם הכיור שקוע בשלב הנייד והאם המשאבה פועלת.

(4) שסתום הייחוס אינו סגור: שסתום הייחוס סגור לאחר האטה.זה בדרך כלל יורד ל-0.1.~ 0.2 מ"ל/דקה לאחר סגירת שסתום ההתייחסות.

סיכום:

במאמר זה מנותחות רק בעיות נפוצות בכרומטוגרפיה נוזלית.כמובן, ביישום המעשי שלנו, ניתקל בעוד בעיות אחרות.בטיפול בתקלות, עלינו לפעול לפי העקרונות הבאים: שנה רק גורם אחד בכל פעם כדי לקבוע את הקשר בין הגורם ההיפותטי לבעיה;בדרך כלל, כאשר מחליפים חלקים לצורך פתרון תקלות, עלינו לשים לב להחזרת החלקים השלמים שפורקו למקומם כדי למנוע בזבוז;יצירת הרגל שיא טוב הוא המפתח להצלחת הטיפול בתקלות.לסיכום, בעת שימוש ב-HPLC חשוב לשים לב לטיפול מקדים בדגימה ותפעול ותחזוקה תקינים של הציוד.